[青桐鸣]2025-2026学年高三9月质量检测考试生物试题
A.DNA模板被其他酵母细胞的基因组DNA污染B.每个引物与DNA模板存在2个配对结合位点答案解析网C.在基因组中Gpd基因有2个拷贝D.在基因组中存在1个与Gpd基因序列高度相似的其他基因自用DNA连接酶连接形成环形DNA，再用苯酚一氯仿抽提除去杂质，最后加人沉淀环形DNA。根据第一次PCR产物测定获得的序列，重新设计一对引物，以环形DNA为模板进行第二次PCR，最后进行测序。用于第二次PCR的一对引I物，其序列应是DNA链上的（A.P1和P2B.P3和P4C.P1和P4D.P2和P3）。根据测序结果拼接获得完整的Gpd基因序列，其中的启动子和终止子具有功能。答案解析网（4）为确定克隆获得的Gpd基因的准确性，可将获得的基因序列与已建立的进行比对。将Gpd基因的编码区与连接，构建重组质粒，再将重组质粒导人酿酒酵母细胞中，实现利用酿酒酵母高效合成甘油的目的。19.（2025·黑吉辽蒙卷）（11分）香树脂醇具有抗炎等功效，从植物中提取难度大、产率低。通过在酵母菌中表达外源香树脂醇合酶基因N，可高效生产香树脂醇。回答下列问题。各限制酶的识别序列和切割位点空白实验组对照组EcoRI5-GAATTC-33-CTTAAG-5M1234500000O子PYLSpeI5-ACTAGT-3'碱基对启动(7.2kb)3-TGATCA-530002000复制原点XhoI5CTCGAG-310003-GAGCTC-5750↑500XbaI5-TCTAGA-3SpeI2503-AGATCT-5ra链引物2引物1Hind Il5-AAGCTT-3注：M为指示分子大小的标准参具b链3-TTCGAA-5照物1~4为菌株号。答案解析网基因N图1图2答案解析网（1）可从中查询基因N的编码序列，设计特定引物。如图1所示，a链为转录模板链，为保证基因N与质粒pYL正确连接，需在引物1和引物2的5端分别引人限制酶识别序列。PCR扩增基因N，特异性酶切后，利用连接DNA片段，构建重组质粒，大小约9.5kb（kb为千碱基对），假设构建重组质粒前后，质粒pYL对应部分大小基本不变。（2）进一步筛选构建的质粒，以1～4号菌株中提取的质粒为模板，使用引物1和引物2进行PCR扩增，电泳PCR产物，结果如图2。在第5组的PCR反应中，使用无菌水代替实验组的模板DNA，目的是检验PCR反应中是否有的污染。初步判断实验组（从“1～4”中选填）的质粒中成功插人了基因N，理由是（3）为提高香树脂醇合酶催化效率，将编码第240位脯氨酸或第243位苯丙氨酸的碱基序列替换为编码丙氨酸的碱基序列，丙氨酸的密码子有GCA等。a是诱变第240位脯氨酸编码序列的引物（GCA为诱变序列），b、c、d其中一条是诱变第243位苯丙氨酸的引物，其配对模板与a的配对模板相同。据此分析，丙氨酸的密码子除GCA外，还有a:5'-.:GCA/CCC/GAG/TTC/TGG/CTG/TTT/CCC/TCT/TTC/TTC...-3'b:5'-..·GAA/CTG/TGG/GAC/ACC/CTG/AAC/TAC/TTC/TCT/GAG...-3c:5'-.GCC/TGG/CTG/TTT/CCC/TCT/TTC/TTC/CCC/TAC/CAC...-3'd:5'-..·GAT/AAT/AAG/ATC/CGA/GAG/AAG/GCC/ATG/CGA/AAG...-3（4）进一步检测转基因酵母菌发酵得到的含量并进行比较，可以选出最优的香树脂醇合酶基因的改造方案。20.（2024·辽宁卷）（10分）将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转人农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题：【2026高考真题分类卷·生物学（十五）第5页（共6页）】
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